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Pérez, R. M. y Torres, A. M. (2026). Evaluación de medios nutritivos preparados con materiales de
bajo costo para el cultivo in vitro de Portulaca grandiflora. Dialógica, Revista Multidisciplinaria,
23(2), 488-509. https://doi.org/10.56219/dialgica.v23i2.5889
Universidad Pedagógica Experimental Libertador
Vicerrectorado de Investigación y Postgrado
Instituto Pedagógico “Rafael Alberto Escobar Lara”
Subdirección de Investigación y Postgrado
Autora: Ruth Milagros Pérez
ruth.perez.ipmar@upel.edu.ve
https://orcid.org/0009-0004-0158-6645
UPEL- Instituto Pedagógico de Maracay
Maracay, Aragua – Venezuela
Autora: Aura Marina Torres
aura.torres.ipmar@upel.edu.ve
https://orcid.org/0009-0006-9969-674X
UPEL- Instituto Pedagógico de Maracay
Maracay, Aragua – Venezuela
PP. 488-509
EVALUACIÓN DE MEDIOS NUTRITIVOS PREPARADOS CON MATERIALES
DE BAJO COSTO PARA EL CULTIVO IN VITRO DE PORTULACA
GRANDIFLORA
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bajo costo para el cultivo in vitro de Portulaca grandiflora. Dialógica, Revista Multidisciplinaria,
23(2), 488-509. https://doi.org/10.56219/dialgica.v23i2.5889
EVALUACIÓN DE MEDIOS NUTRITIVOS PREPARADOS CON MATERIALES DE BAJO COSTO
PARA EL CULTIVO IN VITRO DE PORTULACA GRANDIFLORA
Autora: Ruth Milagros Pérez
ruth.perez.ipmar@upel.edu.ve
https://orcid.org/0009-0004-0158-6645
UPEL- Instituto Pedagógico de Maracay
Maracay, Aragua – Venezuela
Autora: Aura Marina Torres
aura.torres.ipmar@upel.edu.ve
https://orcid.org/0009-0006-9969-674X
UPEL- Instituto Pedagógico de Maracay
Maracay, Aragua – Venezuela
Recibido: Febrero 2026
Aceptado: Mayo 2026
Resumen
El propósito de la investigación fue evaluar el uso de medios nutritivos preparados con
materiales de bajo costo, para el Cultivo In Vitro, en la planta Portulaca grandiflora (Bella
a las once). Los experimentos se realizaron en el laboratorio de Cultivos de Tejidos
Vegetales de la Universidad Pedagógica Experimental Libertador, núcleo Maracay. La
metodología empleada fue experimental con un diseño de grupo de ensayo y control. Se
evaluaron cuatro medios nutritivos diferentes formulados con fertilizantes comerciales
económicos: Nitrofoska, Masterblend y Nutriflora. Los resultados mostraron que el medio
con Nitrofoska fue el más exitoso, porque promovió la formación de un brote por explante
en solo diez días, comparable al tratamiento control con sales más costosas. Se concluyó
que la Nitrofoska, el Centrum, el agua de coco y el almidón de maíz pueden ser sustitutos
viables para la preparación de medios de cultivo. Estas alternativas reducen bastante los
costos al preparar los medios.
Palabras clave: biotecnología vegetal, Portulaca grandiflora, Bella a las once, medios de
cultivo alternativos.
EVALUATION OF NUTRIENT MEDIA PREPARED WITH LOW-COST MATERIALS FOR IN
VITRO CULTURE OF PORTULACA GRANDIFLORA
Abstract
The purpose of this research was to evaluate the use of nutrient media prepared with low-
cost materials for in vitro culture of the Portulaca grandiflora plant (moss rose). The
experiments were conducted in the Plant Tissue Culture Laboratory of the Libertador
Experimental Pedagogical University, Maracay campus. The methodology employed was
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Pérez, R. M. y Torres, A. M. (2026). Evaluación de medios nutritivos preparados con materiales de
bajo costo para el cultivo in vitro de Portulaca grandiflora. Dialógica, Revista Multidisciplinaria,
23(2), 488-509. https://doi.org/10.56219/dialgica.v23i2.5889
experimental, with a trial-control group design. Four different nutrient media, formulated
with inexpensive commercial fertilizers—Nitrofoska, Masterblend, and Nutriflora—were
evaluated. The results showed that the medium with Nitrofoska was the most successful,
promoting the formation of one shoot per explant in just ten days, comparable to the
control treatment with more expensive salts. It was concluded that Nitrofoska, Centrum,
coconut water, and corn starch can be viable substitutes for preparing culture media.
These alternatives significantly reduce the costs of preparing the media.
Key words: plant biotechnology, Portulaca grandiflora, moss rose, alternative growth
medium.
Introducción
El cultivo de tejidos vegetales (CTV) es una herramienta biotecnológica fundamental
en la ciencia y la agricultura moderna, ya que ha evolucionado de un concepto de
laboratorio a una tecnología indispensable a nivel industrial. Su base teórica radica en el
principio de totipotencia celular, que establece que cualquier célula vegetal tiene el
potencial genético para regenerar una planta completa. Este concepto, formulado en el
siglo XX, ha sido la piedra angular de avances que hoy en día permiten la propagación
masiva de plantas y la mejora de sus características. Arano (2023) y Olmos (2023)
destacan que el cultivo de tejidos vegetales se ha convertido en una industria
multimillonaria que aborda desafíos como la seguridad alimentaria y la conservación de
especies. Asimismo, el uso de esta técnica en combinación con herramientas moleculares
como CRISPR/Cas9 está revolucionando la forma en que se obtienen variedades de
cultivos más resistentes a plagas y con mayor rendimiento.
Sin embargo, el costo de las sustancias necesarias para preparar los medios y los
equipos necesarios (como balanza de precisión) puede ser una limitante importante a la
hora de realizar este tipo de ensayos. Por otro lado, es necesario seleccionar un material
vegetal que responda bien y rápido y que pueda ser obtenido con facilidad. De allí que se
plantea una investigación para demostrar que se puede realizar esta técnica de CTV con
materiales de fácil acceso y sin medición con balanzas tan precisas.
Por tanto, esta investigación se llevó a cabo usando como material biológico la
Portulaca grandiflora, mejor conocida como Portulaca, Verdolaga de flor, Flor de seda,
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Pérez, R. M. y Torres, A. M. (2026). Evaluación de medios nutritivos preparados con materiales de
bajo costo para el cultivo in vitro de Portulaca grandiflora. Dialógica, Revista Multidisciplinaria,
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Bella a las once, perteneciente a la familia Portulacaceae. Ulla Rothschuh, bióloga y
redactora de la página Ecología Verde (2023), señala que la Portulaca grandiflora es
originaria de Brasil y Argentina, en América del Sur.
Sin embargo, por su gran atractivo se ha extendido a todo el mundo para decorar
espacios con sus brillantes flores de colores. Es una planta herbácea con hojas carnosas y
suculentas de color verde brillante de forma alargada y cilíndrica. Sus tallos pueden crecer
hacia arriba o alargarse sobre el suelo y medir hasta 35 centímetros de largo. Son plantas
anuales que necesitan exposición a la luz solar para producir sus llamativas flores, por lo
general son de crecimiento lento requieren de 8 a 12 semanas y pueden ponerse en el
suelo o en maceta con el objetivo de controlar su crecimiento.
Las flores en forma de copa se presentan en solitario y pueden ser simples o
compuestas con un extenso y brillante colorido que abarca las más diversas tonalidades
de amarillo, rojo, rosa, blanco, naranja, entre otras (Universidad de Cornell, 2015).
Además, posee la singularidad de producir flores de tonalidades distintas en la misma
planta, las flores se abren solo cuando se encuentran a pleno sol y permanecen cerradas
por la noche o en los días nublados (Bailey, 2014). La Portulaca grandiflora es una planta
medicinal importante con supuesta actividad inmunoestimulante y desintoxicante
(Chavalittumrong et al., 2007). Es interesante promocionar el consumo de estas plantas
y/o su adaptación a la agricultura debido al potencial que presentan como flores
ornamentales de jardín y su uso medicinal y en materia de cuidado y salud (López y
Bretones, 2023; Budiawan et al., 2023).
Debido a la importancia de esta planta, se ha considerado su cultivo y producción de
forma masiva para obtener los metabolitos biológicamente activos en altas
concentraciones, por lo tanto, ya existen sistemas de producción In Vitro que de esta
forma garantizan una producción limpia y dirigida dependiendo de las necesidades de
estudio (Posada-Cruz et al., 2020).
En este contexto, el cultivo de tejidos vegetales ha merecido especial atención
debido a que es una técnica reconocida para el estudio y la multiplicación de plantas, esta
técnica es clave para la investigación de especies que no se cultivan de forma
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Pérez, R. M. y Torres, A. M. (2026). Evaluación de medios nutritivos preparados con materiales de
bajo costo para el cultivo in vitro de Portulaca grandiflora. Dialógica, Revista Multidisciplinaria,
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convencional (Fren, 2024). La principal vía de regeneración de esta planta es la
organogénesis, que se induce principalmente a partir de explantes nodales y ápices de
tallo cultivados (Srivastava y Joshi, citados en Fernández et al., 2019).
Ahora bien, las razones que determinan que el cultivo In Vitro de células y tejidos
vegetales constituya un arte más que una disciplina por derecho propio, las da la
experiencia lo cual es la mejor maestra para este tipo de trabajo; a menudo se afronta el
problema de interpretar con precisión cuál material biológico o cuál medio nutritivo se
debe utilizar para realizar una determinada prueba o experimento y resultan abismales las
distintas formas de hacerlo (Roca y Mroginski ,1991).
Si bien existen muchas fórmulas comerciales, se puede utilizar un medio sencillo y
complementarlo con diferentes componentes y reguladores de crecimiento para llegar
empíricamente a la fórmula que le brinde al tejido las mejores condiciones para su
crecimiento y producción. Se han descrito un gran número de medios nutritivos para el
cultivo de vegetales In Vitro (Murashige y Skoog, 1962). Estos medios de cultivo constan
de sales minerales, vitaminas, aminoácidos, azúcares y reguladores de crecimiento.
La composición del medio de Murashige-Skoog da buenos resultados en el cultivo In
Vitro, ya que contiene los requerimientos nutricionales necesarios para la mayoría de las
especies vegetales y ha sido utilizado en la confección de mezclas comerciales (Rodríguez
et al., 2004). Las investigaciones experimentales han demostrado que se puede
reemplazar sus componentes seleccionando una combinación de nutrientes en función
del conocimiento de la fisiología de la especie, del tipo de cultivo a desarrollar (plántulas,
callos, raíces, meristemos, embriones) o del objetivo del trabajo (crecimiento,
diferenciación u obtención de metabolitos). En varios de los estudios sobre cultivos de
células y tejidos vegetales esto se ha tratado de resolver variando los componentes de los
medios de cultivo (Calva y Pérez, 2005) y las condiciones físicas y fisicoquímicas de los
procesos, aprovechando las ventajas que ofrece la rápida respuesta de las células in vitro
ante pequeños cambios en su medio ambiente con respecto a las plantas crecidas por
métodos tradicionales.
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Pérez, R. M. y Torres, A. M. (2026). Evaluación de medios nutritivos preparados con materiales de
bajo costo para el cultivo in vitro de Portulaca grandiflora. Dialógica, Revista Multidisciplinaria,
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Los primeros medios nutritivos tradicionales utilizados en cultivo de células y tejidos
vegetales fueron semisintéticos debido al alto costo y la demanda que presentaban sus
diversos componentes. Frecuentemente contenían extractos o complejos orgánicos como
agua de coco, hidrolizado de caseína y extracto de levadura. Actualmente, en palabras de
Calva y Pérez (2005), la mayoría de los medios son de composición conocida estando
constituidos básicamente por cinco grupos de ingredientes: nutrientes inorgánicos, fuente
de carbono, fuente de nitrógeno, vitaminas y reguladores del crecimiento que in vivo son
sintetizados por una parte u órgano de la planta para luego ser transportados a otros
órganos donde se metabolizan y/o acumulan.
Con respecto a los medios gelificantes, el más convencional es el agar solidificante,
pues la demanda ha elevado su precio, y se puede reemplazar por algunos almidones
como crema de arroz, maicena, (Flores, Robledo y Jimarez, 2017; Hernández, Carrizales,
Moreno, Flores y Fiorello, 2016) en cuanto a las fuentes de nitrógeno más comunes son el
nitrato y amonio, pero también se han utilizado urea, hidrolizado de caseína, extracto de
levadura y aminoácidos, entre otros.
La fuente de carbono más empleada es la sacarosa o glucosa y en menor grado la
maltosa, galactosa, almidón y melaza. Los micronutrientes, generalmente adicionados al
medio de cultivo en forma de sales, son utilizados por las células como cofactores
enzimáticos, como el molibdeno para la nitrato reductasa y el magnesio para algunas
cinasas (Murashige y Skoog 1962). Todas estas sustancias son de alto costo y de difícil
acceso. En el caso del Laboratorio de Cultivo In Vitro de Tejidos Vegetales, adscrito al
Núcleo de Investigación, Docencia y Extensión en la Enseñanza de la Ciencia y la
Tecnología (NIDEECYT) de la Universidad Pedagógica Experimental Libertador (UPEL)
Núcleo Maracay, la falta de disponibilidad constante de estos materiales necesarios
retrasa o impide el desarrollo de las investigaciones en el área. Por lo tanto, se hace
necesario evaluar alternativas experimentales que, a su vez, permitan enriquecer el
conocimiento teórico-práctico al respecto.
La búsqueda de medios nutritivos de bajo costo y fácil preparación, puede hacerse
tomando en consideración que los fertilizantes líquidos comerciales de uso agrícola o
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doméstico pueden servir para sustituir las sales minerales (macro y microelementos)
(Organización de Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura, FAO, 1999),
además no se requieren balanzas de precisión por tratarse de sustancias en estado
líquido. Las hormonas pueden ser sustituidas por agua de coco (Patiño, Mosquera y
González, 2011). Los gelificantes como el agar pueden sustituirse por almidón de maíz
(Herrera, Silva y Sánchez, 2013) y las vitaminas pueden ser aportadas utilizando
polivitamínicos de uso humano. Sin embargo, los antecedentes encontrados reportan
respuestas morfogénicas de brotes, callos y raíces pero con poco vigor y respuesta lenta,
de allí que se emprende una investigación para evaluar distintos fertilizantes líquidos
(Hernández, Carrizales, Moreno, Flores y Fiorello 2016).
Por otra parte, se evalúa la respuesta de plantas domésticas comunes e inclusive
silvestres, lo que facilita su uso en laboratorios de Biología de Educación Media General. Al
respecto, Delgado (2012) plantea que:
La biotecnología vegetal tiene un gran potencial para aportar en la solución de
problemas mundiales de alto impacto como el déficit alimentario que se
prevé, la producción de materiales para la salud, la industria y la preservación
ambiental. De ahí la importancia de introducirla en la enseñanza de la
educación básica y media, para que las generaciones futuras puedan hacer un
uso adecuado de sus productos y aplicaciones, tomando decisiones
responsables en cuanto a políticas públicas y de impacto ambiental. El cultivo
de tejidos vegetales “in vitro” es una oportunidad para desarrollar
competencias laborales en los jóvenes de la educación media, lo que genera
retos para el diseño y desarrollo de herramientas pedagógicas novedosas y
creativas que estimulen el pensamiento complejo en los estudiantes. (p. 9)
De lo anterior se desprende que la biotecnología vegetal es una herramienta crucial
para el futuro del planeta; por lo tanto, la escuela tiene la responsabilidad de enseñarla
críticamente. El cultivo de tejidos in vitro se presenta como la estrategia didáctica ideal en
la educación media para conectar la teoría científica con el desarrollo de habilidades
técnicas y el pensamiento crítico de los estudiantes. Además, se facilita distintas
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Pérez, R. M. y Torres, A. M. (2026). Evaluación de medios nutritivos preparados con materiales de
bajo costo para el cultivo in vitro de Portulaca grandiflora. Dialógica, Revista Multidisciplinaria,
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actividades en el laboratorio ofrece la oportunidad de aprendizaje práctico a los
estudiantes con materiales de fácil acceso para que todos puedan realizarlo.
El propósito fundamental de este artículo fue evaluar el uso de medios nutritivos
preparados con materiales de bajo costo, para el Cultivo In Vitro, en la planta Portulaca
grandiflora (Bella a las once) y con esto compartir con la comunidad en general una forma
de propagar una especie vegetal común, de fácil adquisición y capacidad reproductiva.
Materiales y métodos
La metodología empleada responde a un diseño experimental. Según Arias (2006),
este se define como el proceso de someter a un objeto a determinadas condiciones o
tratamientos para observar sus reacciones y en la que se manipula al menos una variable
independiente (medios de cultivo) para observar su efecto sobre otra u otras variables
dependientes (organogénesis y porcentaje de asepsia) en un ambiente controlado. Aquí se
incluirían los diseños de grupo de ensayo y control. Por tanto, el estudio es de nivel
explicativo, debido a que se busca establecer las causas y efectos de un fenómeno.
Los experimentos que se describen en el presente informe se realizaron en las
instalaciones del laboratorio de Cultivos de Tejidos Vegetales de la Universidad
Pedagógica Experimental Libertador, Núcleo Maracay en Venezuela. Es importante
mencionar que se realizaron tres ensayos debido a que en el primer diseño se obtuvo gran
cantidad de contaminación y los explantes no demostraron una respuesta morfogénica
favorable, en el segundo ensayo se contaminó de forma masiva sin posibilidad de
respuesta alguna, por tal razón se debió realizar un tercer ensayo, cambiando la planta
Catharanthus roseus por Portulaca grandiflora, y modificaciones necesarias a los medios
nutritivos a evaluar.
En cuanto al material vegetal, en el primer y en el segundo ensayo el material
utilizado fue la planta de Buenas tardes (Catharanthus roseus) proveniente de una
vivienda particular de la ciudad de Turmero. Para el tercer ensayo la planta utilizada fue
Bella a las once (Portulaca grandiflora) obtenida en un vivero comercial de la ciudad de La
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Pérez, R. M. y Torres, A. M. (2026). Evaluación de medios nutritivos preparados con materiales de
bajo costo para el cultivo in vitro de Portulaca grandiflora. Dialógica, Revista Multidisciplinaria,
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Victoria, Estado Aragua- Venezuela. Cabe destacar que en todos los ensayos se tomaron
plantas de aspecto saludable, vigorosas, de las cuales se tomaron hojas y tallos jóvenes sin
floración. Para el primer ensayo los explantes utilizados fueron discos de hojas sin
nervadura central y micro esquejes de la planta Buenas Tardes. Para el segundo ensayo
solo se usó microesquejes de la misma planta. Y para el tercer y último ensayo se
utilizaron microesquejes de Bella a las once. Los diseños de los tres ensayos se describen
en la tabla 1 en la cual se muestra una comparación entre los tres ensayos realizados,
haciendo referencia principalmente al suplemento hormonal de BAP 2.5mg/l y Kinetina
2mg/l.
Tabla 1
Medios nutritivos control
Para el primer ensayo se evaluó el fertilizante triple 15 en distintas concentraciones
como macronutriente y como micronutriente el Enraizante de 1 ml/l, de igual forma se
evaluó el componente vitamínico Plexamin en una proporción de 4 ml/l (Ver tabla 2).
Tabla 2
Medios Nutritivos Control
Compuestos
Cantidades
Ensayo 1 y 2
Cantidades
Ensayo 3
Macroelementos de M&S
100ml
Microelementos de M&S
10ml
Hierro EDTA
5ml
Vitaminas
Inositol
100mg/l
Tiamina (HCL)
0,1mg/l
Acido Nicotínico
0.5mg/l
Piridoxina
0.5mg/l
Glicina (Aminoácido)
0,2mg/l
Hormonas
Kinetina
-
2mg/l
Auxina: Acido 3, indolacético (AIA)
1mg/l
-
Citoquininas (B, AP o BP)
2.25mg/l
-
BAP
2.5mg/l
-
Otros
Sacarosa
30g/l
Agar
7,5g/l
pH
5.7-5.8
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Medio nutritivo utilizado en el ensayo 1
A continuación, en la figura 1, se muestran la vitamina (Plexamin) y los aportes de
macronutrientes (Triple 15) y micronutrientes (Enraizante) evaluados para el primer
ensayo.
Figura 1
Materiales evaluados en el primer ensayo
Leyenda: a) Vitamina Plexamin. b) Triple 15. c) Enraizante.
En vista de los resultados desfavorables en la evaluación del primer medio, se
analizaron los resultados y se tomó la decisión de realizar un segundo diseño, con la
finalidad de mejorar la respuesta morfogénica, modificándolo de la siguiente forma (ver
tabla 3). Se utilizó nuevamente el fertilizante Triple 15 en distintas y menores
concentraciones que en el primer ensayo, el Nitrofoska para la provisión de
micronutrientes y la vitamina utilizada fue Centrum.
T1
T2
T3
T4
M&S
Triple 15
15 g/l
Triple 15
20 g/l
Triple 15
30 g/l
-
Enraizante 1 ml/l
-
4 ml/l
-
70 g/l
-
30 g/l
-
300 ml/l
a)
b)
a)
c)
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Tabla 3
Medio nutritivo utilizado en el ensayo 2
Por último, y como consecuencia de la contaminación masiva y total que se produjo
en el ensayo #2, se decidió realizar el tercer ensayo (ver tabla 4), en esta ocasión se
modificó no solo el medio nutritivo, evaluando los fertilizantes Nitrofoska, Masterblend y
Nutriflora, sino que también se cambió la planta a utilizar, siendo esta Portulaca
grandiflora, en base al trabajo realizado por las estudiantes de la Maestría y los resultados
favorables obtenidos con dicha planta, Díaz y Mejías (2016).
Tabla 4
Medio nutritivo del ensayo 3
A continuación, en la figura 2, se muestran en la fotografía los materiales utilizados
para el tercer medio nutritivo realizado, de izquierda a derecha se observan los frascos
que contienen las sales de M&S, los fertilizantes Nitrofoska, Masterblend y Nutriflora, la
vitamina Centrum, el agua de coco y la Maicena.
Figura 2
Componentes
T1
T2
T3
T4
Sales minerales
M&S
Triple 15
5 g/l
Triple 15
10 g/l
Triple 15
15 g/l
Nitrofoska
-
3 ml/l
Centrum
-
1 mg/l
Almidón de
maíz
-
70 g/l
Sacarosa
-
30 g/l
Agua de coco
-
300ml/l
Componentes
T1
T2
T3
T4
Sales minerales
M&S
Nitrofoska
4 ml/l
Masterblend
4 ml/l
Nutriflora
100 ml/l
Centrum
-
1 ml/l
Almidón de
maíz
-
70 g/l
Sacarosa
-
30 g/l
Agua de coco
-
300 ml/l
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Materiales utilizados para la composición del tercer medio nutritivo
Para la desinfección del material vegetal se utilizaron las siguientes medidas
asépticas: Se tomaron las porciones necesarias del material vegetal y se lavaron con la
solución jabonosa durante 10 minutos bajo agitación constante. Posteriormente se
enjuagaron con abundante agua destilada. Para continuar se tomó el segmento del
entrenudo y se llevó a una segunda desinfección con Hipoclorito de Sodio al 5,5 % por un
lapso de 10 minutos bajo agitación. Para finalizar se enjuagó 3 veces con agua destilada
esterilizada.
Para el proceso de implantación se tomaron medidas rigurosas de asepsia y cuidado
para evitar la contaminación de los tratamientos y los explantes, teniendo como
precaución el uso de materiales como servilletas, pinzas y bisturí totalmente esterilizados,
antes y durante el proceso de la siembra. Se realizó el aseo de las manos con agua, jabón y
alcohol, y bajo ningún concepto se hizo contacto previo con el material vegetal. Por
último, se estableció el uso correcto de tapabocas, gorro y bata. En cada uno de los
ensayo se realizaron 10 repeticiones por cada tratamiento, donde cada frasco contenía
tres explantes, para un total de 50 frascos y 150 explantes para los ensayos 1, 2 y 3.
Presentación y discusión de resultados
Ensayo N° 1. Para el primer ensayo se utilizó la planta Catharanthus roseus (Buenas
Tardes), ya que es de fácil adquisición y cultivo, de igual manera para los medios nutritivos
se utilizaron compuestos alternativos de bajo costo con la finalidad de que a los
estudiantes no les sea complicado ni costoso adquirir los materiales para realizar este tipo
de experimentos, como se puede observar en la figura 3b, en la segunda semana ya se
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a
b
c
d
e
f
presentaba contaminación en los frascos sin respuesta de ninguno de los explantes.
Al pasar las semanas los explantes tanto de discos de hojas como de yemas axilares
se necrosaron y perdieron la coloración tornándose amarillentos (Figuras 3d y 3e). Sin
embargo, de este ensayo no se obtuvo una respuesta morfogénica significativa por parte
de los explantes. También se pudo observar que el 10% de los tratamientos se mantuvo
completamente asépticos, de los cuales 5% pertenece al tratamiento control y el otro 5%
al tratamiento con medios alternativos y sales de M&S. Es importante señalar que en uno
de los explantes perteneciente a yemas axilares se produjo una sola respuesta
morfogénica, teniendo como resultado un callo en uno de los tratamientos con el medio
nutritivo de M&S.
Figura 3
Primer ensayo realizado con planta Buenas Tardes
Leyenda: a) Primer día del montaje discos de hojas y microesquejes. b) 2da semana de cultivo con presencia de hongos.
c) Respuesta morfogénica de callos en un explante. d) Explantes necrosados. e) Explantes pálidos, pérdida de
pigmentación. f) Tratamientos asépticos.
Ensayo N° 2. En vista de que en el primer montaje no produjo una respuesta
significativa, se procedió a realizar un segundo ensayo, tomando en consideración los
posibles errores presentados en el primer ensayo y las observaciones tomadas del mismo,
por tanto, en el protocolo del segundo montaje, se disminuyó la cantidad de triple 15
utilizado (Tabla 1 y 2). De igual manera, se sustituyó la vitamina utilizada y las sales
minerales, en busca de una mejor respuesta de los explantes. Sin embargo, como se
evidencia en la figura 4, la contaminación que se presentó en este ensayo fue total al cabo
de una semana, donde el 100% de los tratamientos se encontraba con gran cantidad de
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hongos, los cuales niegan la posibilidad de producir respuestas de las plantas sembradas.
Figura 4
Segundo ensayo realizado con plantas Buenas Tardes
Ensayo N° 3. En el tercer ensayo se cambió la planta que se había utilizado
anteriormente, Catharanthus roseus por no tener una respuesta satisfactoria a pesar del
tiempo y las condiciones de asepsia que se aportó a dicho ensayo. Por lo tanto, en esta
oportunidad se trabajó con la planta de Portulaca grandiflora implantada en un medio
nutritivo compuesto por las sales minerales de M&S suplementado con BAP 2,5. (ver
figura 5).
Figura 5
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Pérez, R. M. y Torres, A. M. (2026). Evaluación de medios nutritivos preparados con materiales de
bajo costo para el cultivo in vitro de Portulaca grandiflora. Dialógica, Revista Multidisciplinaria,
23(2), 488-509. https://doi.org/10.56219/dialgica.v23i2.5889
Tercer ensayo realizado con Bella a las once
Leyenda: a) Tratamientos control asépticos. b) y c) Mejores respuestas morfológicas con
presencia de brotes. Semana #1.
Al transcurrir tres semanas de la implantación aséptica de los microesquejes de la
planta Portulaca grandiflora, se pudieron obtener los resultados que se muestran en la
figura 6. Se puede apreciar en primer lugar la Figura 6a, permite apreciar el tratamiento
control con el medio nutritivo de M&S + 2.5 BAP, y las mejores respuestas en los distintos
tratamientos, donde el tratamiento #2 es el que contiene el fertilizante Nitrofoska (Figuras
6b y 6c respectivamente) y el tratamiento #4 compuesto por fertilizante Nutriflora (Figura
6d).
Figura 6
Tercera semana del ensayo con Bella a las once
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23(2), 488-509. https://doi.org/10.56219/dialgica.v23i2.5889
Leyenda: a) Tratamiento control. b) y c) Tratamiento 2. d) Tratamiento 4. Semana #3 y 3
días.
Los resultados en cuanto a respuesta morfogénica se pueden apreciar en la tabla 5,
en el cual se arrojan datos de los porcentajes de explantes verdes, brotes longitudinales y
aparición de callos, por tratamiento al cabo de tres semanas de observaciones
consecutivas, obteniéndose un total en todos los tratamientos realizados de un 63% de
vigor y coloración verde en los explantes, 26% de brotes y un 4% de formación de callos.
Los mejores resultados obtenidos en cuando a la coloración verde pertenecen al
tratamiento 1 con las sales de M&S y hormonas, vitaminas y gelificantes de bajo costo,
con el 63% y en segundo lugar el tratamiento 2 con Nitrofoska con el 56%. De la misma
manera, el tratamiento con mejor resultado para la formación de brotes fue el
tratamiento 1 con las sales de M&S con el 30% de respuesta morfogénica e igualmente en
el tratamiento 2 con Nitrofoska se obtuvo el 20% de los frascos con brotes. Por otro lado,
cabe destacar que se formaron callos en los tratamientos 3, con el 6% y el tratamiento 4
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con el 10% de formación de callos.
Tabla 5
Crecimiento y formación de brotes y callos
Leyenda: T0: Control. T1: M&S. T2: Nitrofoska. T3: Masterblend. T4: Nutriflora Ve: Verde.
Br: Brotes. Ca: Callos. Crecimiento: + 02-04cm/ ++ 0.5-0.8/ +++ 0.9-1.3
En la tabla 6, se pueden observar los niveles de contaminación en los tratamientos
realizados al inicio y al final de las observaciones, obteniendo un total de 17% de asepsia
total, para todos los frascos. En este sentido, se observó que con bella a las once se logró
afinar la técnica de desinfección, extracción e implantación, lo cual se evidencia en la
disminución progresiva de la contaminación.
Tabla 6
Porcentaje de tratamientos contaminados al concluir el ensayo
Semana
Tratamiento
T0
T1
T2
T3
T4
1
100% ve/
50% Br+
100% Ve/
30 %Br+
100% Ve/
20% Br+
80% Ve/
20% Br+
100% Ve
2
100% Ve
80% Br++
30% Ca
50% Ve
30% Br++
40% Ve
20% Br++
30% Ve
10% Br++
10% Ca
40% Ve
20% Ca
3
100% Ve
50% Br+++
20% Ca
40% Ve
30% Br+++
30% Ve
20% Br++
20% Ve
10% Ca
20% Ve
10% Ca
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Leyenda: T0: Control. T1: M&S. T2: Nitrofoska. T3: Marterblend. T4: Nutriflora
Ho: Hongos. Ba: Bacterias. As: Aséptico.
En el ensayo experimental N° 1 y N° 2, realizados con la planta Catharanthus roseus
(Buenas tardes), no se obtuvo respuesta morfogénica significativa. En relación a estos
resultados, Acosta y Rodríguez (2002), señalan que en la planta de buenas tardes las
mayores afectaciones son las ocasionadas por el hongo Rhizoctonia solani en los
semilleros, para su control recomiendan hacer selección negativa, esto es, eliminar las
plantas afectadas, además de regular los riegos; en las plantaciones se producen
afectaciones originadas por el hongo Colletotrichum sp que afecta hojas y ramas llegando
a ocasionarle la muerte, la enfermedad es frecuente en época de fuertes lluvias, altas
temperaturas y humedad relativa superior al 80 %.
El experimento realizado con los medios nutritivos de bajo costo, aplicados a
explantes de Portulaca grandiflora presentó un proceso de organogénesis directa el cual
fue observado en medio con Nitrofoska (4 ml/l), obteniendo un número promedio de 1
brote por explante a los 10 días de cultivo, resultado similar al tratamiento testigo. El
mayor porcentaje de asepsia se obtuvo con Portulaca grandiflora con el 17% de
supervivencia. Es decir, que el fertilizante Nitrofoska sirve como sustituto de las sales
minerales, el polivitamínico Centrum, el agua de coco que aporta hormonas y el almidón
de maíz para gelificar pueden servir, como sustitutos en la preparación de medios
nutritivos para el cultivo In Vitro de yemas axilares de Portulaca grandiflora. Ya que su uso
disminuye los costos, facilita la preparación y produce respuestas favorables y suficientes
con fines didácticos.
Semana
Tratamiento
T0
T1
T2
T3
T4
1
40 Ho
40 Ba
30 As
30 Ho
20 Ba
50 As
50 Ho
20 Ba
30 As
80 Ho
20 As
40 Ho
20 Ba
40 As
3
90 Ho
10 As
80 Ho
20 Ba
70 Ho
20 Ba
10 As
80 Ho
20 As
80 Ho
20 Ba
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Conclusiones
En función al propósito de la investigación el cual fue evaluar el uso de medios
nutritivos preparados con materiales de bajo costo, para el Cultivo In Vitro vegetal se
evidenció que se obtuvo una mejor respuesta en la Portulaca grandiflora (Bella a las once)
que en la planta Catharanthus roseus (Buenas tardes).
Se logró la implantación aséptica del 10% de los frascos cultivados de Catharanthus
roseus para el primer ensayo. En
Catharanthus roseus
se obtuvo respuesta de
encorvamiento de los discos de hojas a la semana siguiente de ser implantado. Sin
embargo, no se obtuvieron otras respuestas morfogénicas significativas además de un
callo de un explante. Por otro lado, se logró la implantación aséptica del 17% de los
frascos cultivados de Portulaca grandiflora durante el tercer ensayo realizado.
El mejor fertilizante resultó Nitrofoska en dosis de 4 ml/l, por cuanto en ella se
obtuvo formación de brotes y crecimiento longitudinal del mismo, similar a los testigos.
Por su parte, el fertilizante que dio respuestas menos favorables fue Nutriflora, si se habla
de formación de brotes, sin embargo, es importante resaltar que con este fertilizante se
obtuvo un 10% de formación de callos. Las respuestas experimentales ocasionadas por los
fertilizantes comerciales evaluados son menores a las obtenidas en el medio control.
Por tanto, se concluye que el fertilizante Nitrofoska (4 ml/l) puede servir como
sustituto de macronutrientes y micronutrientes, y la vitamina Centrum (1 ml/l), agua de
coco, sustituyen el engorroso proceso de pesaje de sustancias en la preparación de
medios nutritivos para el estudio In Vitro de yemas axilares de Portulaca grandiflora ya
que su uso disminuye los costos, tiempo y produce respuestas favorables y suficientes con
fines didácticos.
Referencias
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Síntesis curricular
Ruth Milagros Pérez
Profesora de Biología en la UPEL-Maracay. Máster en Educación en la UPEL-Maracay,
especializándome en la didáctica de las ciencias. Mi tesis se centró en la implementación de la
Metodología B-learning en el aula, un enfoque es aplicado a lo largo de mi carrera docente.
Actualmente me desempeño como docente de cátedra de Biología General y Jefe de la Sección de
Socioeconómico de la UPEL Maracay.
Aura Marina Torres
Magister en Educación Mención Enseñanza de la Biología. Profesora especialidad Biología.
Coordinadora de la Maestría en Educación: Ambiente y Desarrollo de la UPEL-Maracay.
Coordinadora del Núcleo de Investigación Docencia y Extensión para la Enseñanza de la Ciencia y
la Tecnología. Coordinadora de la unidad curricular Genética y Tópicos de Biotecnología. Tutora y
Jurado de Trabajos de Grado de Maestría. Facilitadora de cursos y talleres en Ciencias,
investigación y Didáctica.